انواع PCR حیوانات
PCR حیوانات چیست؟
واکنش زنجیره‌ای پلیمراز PCR یک روش قدرتمند برای تقویت بخش‌های خاصی از DNA است که متمایز از شبیه‌سازی و تکثیر در سلول میزبان است. این روش از نظر بیوشیمیایی به صورت In Vitro یعنی در شرایط آزمایشگاهی انجام می‌شود. PCR توسط کاری مولیس در سال 1983 اختراع شد. وی در سال 1993 جایزه نوبل شیمی را با مایکل اسمیت به اشتراک گذاشت.
آزمون های تشخیصی بر پایه ملکولی PCR و RT-PCR جهت تشخیص بسیاری از بیماری ها و شناسایی عوامل بیماریزا درآزمایشگاه دامپزشکی درحوزه طیور و حیوانات خانگی (سگ و گربه) با روش اجرایی مدون در حال فعالیت می باشد .
از PCR در زیست شناسی مولکولی برای تهیه نسخه های زیادی از بخش های کوچک دی ان ای یا یک ژن استفاده می شود. در موجودات زنده، مجموعه ای از چند آنزیم در فرآیند همانند سازی DNA نقش دارند. در این تکنیک ابتدا پرايمر از DNA موردنظر، طراحي مي شود و بعدا با استفاده ازPCR ، هدف را تكثير كرده و توسط الكتروفورز در مقابل يك كنترل مي سنجند.
آزمایشگاه مولکولی PCR
دامنه فعالیت این ازمایشگاه جستجوی ماده وراثتی (ژنوم) میکروب ها در نمونه های مرضی و بهداشتی می باشد و شامل موارد زیر است:
- انواع باکتری ها و ویروس های مطرح دردامپزشکی و بهداشت عمومی، از جمله شناسایی مایکوپلاسما، بروسلا، سالمونلا، مایکوباکتریوم، نیوکاسل، برونشیت عفونی و….
- تفکیک اجرام بیمریزا از واکسینال، مانند عوامل بیماریهای مایکوپلاسما سینوویه، نیوکاسل، برونشیت عفونی و…
- تعیین جنسیت پرنده ها از ابتدای تولد
- تعیین نوع گوشت (مرغ، ماهی و … در تقلب ها) در تقلب های مواد غذایی
پزشکی با تجربه در درمان حیوانات
سلامتی حیوان عزیزتان را به دست پزشکی با تجربه بسپارید!
برای درمان مطمئن و مراقبت‌های ویژه همین حالا با پت کلینیک تماس بگیرید
آزمایش PCR
آزمايش PCR يك سيستم بسيار پيشرفته و دقيق جهت شناسايي اجراl بيماري زا مي باشد. اساس اين آزمايش بر اين اصل استوار است كه از يك قطعه ژن ميكروارگانيسم ها نسخه متعددي تهيه شده و بر اساس آن نوع ميكروب تشخيص داده مي شود.
در علم دامپزشكي به ميزان وسيعي از روش PCR جهت جستجو و شناسايي اجرام بيماري زا از جمله تعيين آلودگي گله طيور به عوامل مايكوپلاسمايي همچون MS و MG ، تشخيص و شناسايي ويروس هاي همچون آنفلوآنزاي پرندگان، برنشيت عفوني طيور و غيره استفاده مي شود. همچنين اين روش در كمك به تشخيص دقيق بيماريهاي آبزيان بسيار مؤثر تر عمل مي نمايد.
همچنین با استفاده از روش real time pcr امکان جستجوی دقیق تر میکروب ها به صورت کیفی و کمی در نمونه های ارسالی میسر شده است. آزمون های تشخیصی بر پایه ملکولی PCR و RT-PCR جهت تشخیص بسیاری از بیماری ها و شناسایی عوامل بیماری زا در آزمایشگاه دامپزشکی از جمله کلینیک دامپزشکی دکتر مسعود رحیمی پور در حوزه طیور و حیوانات خانگی (سگ و گربه) با روش اجرایی مدون در حال فعالیت می باشد .
سوالات متداول PCR حیوانات
در صورت تمایل با ما تماس بگیرید
PCR یا واکنش زنجیره‌ای پلیمراز یک تکنیک آزمایشگاهی است که برای تکثیر و شناسایی DNA به کار می‌رود. در این فرآیند، DNA هدف در یک محیط کنترل شده، تحت تأثیر چرخه‌های حرارتی قرار می‌گیرد. این چرخه‌ها شامل سه مرحله اصلی هستند: دناتوراسیون، اتصال و تمدید. در مرحله دناتوراسیون، دما به اندازه‌ای افزایش می‌یابد که دو رشته DNA از هم جدا می‌شوند. در مرحله اتصال، دما کاهش می‌یابد تا پرایمرها به نقاط خاصی از DNA متصل شوند. سپس در مرحله تمدید، دما به میزان مشخصی افزایش می‌یابد تا آنزیم DNA پلیمراز به کار افتد و رشته‌های جدید DNA ساخته شوند. این فرآیند چندین بار تکرار می‌شود (معمولاً 25 تا 35 بار) و نتیجه آن تولید میلیون‌ها نسخه از DNA هدف است.
انواع مختلف PCR شامل چندین روش تخصصی هستند که هر کدام برای مقاصد خاصی طراحی شده‌اند:
- PCR استاندارد: این روش برای تکثیر DNA از الگوهای اولیه به کار می‌رود و معمولاً اطلاعات کمی درباره میزان DNA تولید شده ارائه می‌دهد.
- PCR کمی (qPCR یا Real-time PCR): این تکنیک امکان اندازه‌گیری میزان DNA در طول فرآیند PCR را فراهم می‌کند و به ما اجازه می‌دهد تا تغییرات در بیان ژن‌ها یا بار ویروسی را با دقت بالاتری ارزیابی کنیم.
- PCR چندگانه (Multiplex PCR): با استفاده از چندین پرایمر، این روش به ما اجازه می‌دهد تا چندین نوع پاتوژن یا ژن خاص را در یک آزمایش شناسایی کنیم.
- RT-PCR (Reverse Transcription PCR): این روش برای تکثیر RNA استفاده می‌شود که ابتدا به cDNA تبدیل می‌شود. این تکنیک برای بررسی بیان ژن‌ها و عفونت‌های ویروسی بسیار مهم است.
- PCR دیجیتال (dPCR): این روش امکان اندازه‌گیری دقیق تعداد مولکول‌های DNA را فراهم می‌کند و برای تجزیه و تحلیل‌های دقیق و بررسی بار ویروسی کاربرد دارد.
بله، با استفاده از PCR چندگانه، این امکان وجود دارد که چندین نوع بیماری یا عفونت را در یک آزمایش شناسایی کنیم. این روش به ویژه در مواقعی که حیوان ممکن است به چندین پاتوژن آلوده باشد، بسیار کارآمد است. برای مثال، در بررسی‌های اپیدمیولوژیک یا در شرایط بحرانی، PCR چندگانه می‌تواند به دامپزشکان کمک کند تا اطلاعات جامع‌تری درباره وضعیت سلامت حیوانات و نحوه مدیریت بیماری‌ها به دست آورند. این روش همچنین می‌تواند زمان و هزینه‌های تشخیصی را کاهش دهد و در نتیجه روند درمان را تسریع کند.
فرآیند PCR شامل سه مرحله اصلی است:
- دنتوراسیون: در این مرحله، دما به حدود 95 درجه سانتی‌گراد افزایش می‌یابد تا دو رشته DNA از هم جدا شوند.
- اتصال: در این مرحله، دما به حدود 50 تا 65 درجه سانتی‌گراد کاهش می‌یابد تا پرایمرها به نقاط خاصی از رشته‌های DNA متصل شوند.
- تمدید: در این مرحله، دما به حدود 72 درجه سانتی‌گراد افزایش می‌یابد و آنزیم DNA پلیمراز به کار می‌افتد و رشته‌های جدید DNA تولید می‌شوند.
این چرخه‌ها به طور متناوب تکرار می‌شوند تا مقدار DNA هدف به طور قابل توجهی افزایش یابد و به این ترتیب میلیون‌ها نسخه از DNA تولید می‌شود.
PCR به دلیل دقت و حساسیت بالا، به عنوان یکی از بهترین روش‌ها برای تشخیص بیماریهای عفونی در حیوانات شناخته می‌شود. این تکنیک می‌تواند به سرعت و دقت انواع عفونت‌های ویروسی و باکتریایی را شناسایی کند. به عنوان مثال، PCR می‌تواند برای تشخیص پاروویروس، ویروس هاری و دیگر عفونت‌های مشترک در حیوانات خانگی مانند سگ و گربه استفاده شود. با شناسایی سریع و دقیق پاتوژن‌ها، دامپزشکان می‌توانند درمان مناسب را به موقع آغاز کرده و از شیوع بیشتر بیماری جلوگیری کنند.
بله، PCR به دلیل دقت بالا و حساسیت در شناسایی عفونت‌های ویروسی، مانند ویروس هاری، پاروویروس و ویروس‌های دیگر در حیوانات خانگی بسیار مؤثر است. این تکنیک به دامپزشکان کمک می‌کند تا به سرعت تشخیص صحیحی از وضعیت سلامت حیوان ارائه دهند. با تشخیص زودهنگام، می‌توان اقدامات لازم را برای درمان یا پیشگیری از شیوع بیماری انجام داد.